Мультиплексный скрининг вирусов КРС

Наборы ИФА для антигенной  диагностики и серодиагностики фекалий и плазмы крови КРС

Закажите звонок и получите консультацию специалистов по наборам и тестам мультиплексного скрининга вирусов у телят и другого крупного рогатого скота. Продажа тестов оптом в Москве и Владимире от компании НЕОТЕСТ, официального дистрибьютера BIO-X в России

1. Наборы ИФА для антигенной диагностики ротавируса, коронавируса, фактора прикрепления F5 E. coli и криптоспоридий (исследование фекалий)

Специфические антитела, продуцируемые против патогенов, ответственных за пищеварительные заболевания, иммобилизовали на чередующихся рядах 8 х 12-луночных микротитрационных планшетов. Эти антитела позволяют специфически захватывать соответствующие патогены в образцах фекалий. Ряды A, C, E, G были сенсибилизированы этими антителами, а ряды B, D, F, H содержат неспецифические антитела. Эти ряды позволяют различать специфические иммунологические реакции и неспецифическое связывание, чтобы исключить ложноположительные результаты.

Фекалии разводят в буфере для разбавления и инкубируют на микропланшете в течение 1 часа при 21°С +/- 3°С. После этой первой стадии инкубации планшет промывают, а затем в лунки добавляют конъюгаты, меченные пероксидазой моноклональные антитела против патогенов. Затем планшет инкубируют в течение 1 часа при 21°C +/- 3°C.

После этой второй стадии инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена состоит в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не канцерогенный.

Подробнее

2. Набор ИФА для серодиагностики респираторно-синцитиальной инфекции (BRSV), парагриппа 3 (BPI3), микоплазмоза КРС, Mannheimia haemolytica, аденовируса 3  (исследование сыворотки и плазмы крови КРС)

В тесте используются 96-луночные планшеты для микротитрования, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к трем патогенам (BRSV, BPI3 и аденовирусу). Эти антитела используются для захвата патогенов, а также для их очистки от лизатов клеток, в которых выращивались вирусы. Для Mycoplasma bovis планшет сенсибилизирован рекомбинантным белком Mycoplasma bovis, экспрессируемым E. coli. Ген из Mycoplasma bovis экспрессируется этой рекомбинантной культурой E.coli. Для Mannheimia haemolytica планшет сенсибилизирован очищенным липополисахаридом (LPS). Распределение этих возбудителей на микротитрационном планшете выглядит следующим образом:

• Лунки 1 и 7: BRSV
• Лунки 2 и 8: BPI3
• Лунки 3 и 9: Mycoplasma bovis
• Лунки 4 и 10: Mannheimia haemolytica
• Лунки 5 и 11: Аденовирус 3
• Лунки 6 и 12: отрицательный контроль

Лунки 6 и 12 содержат одно моноклональное антитело. Использование такого контроля значительно снижает количество ложных срабатываний. Исследуемые сыворотки и плазма разбавляются 1:100 в соответствующем буфере и инкубируются на планшете в течение одного часа при 21°С +/- 3°С. Планшет промывают и в лунки добавляют конъюгат, меченое пероксидазой моноклональное антитело против бычьего IgG1. Планшет повторно инкубируют при 21°С +/- 3°С в течение 1 часа. После этой второй инкубации препарат промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в исследуемых сыворотках присутствуют специфические иммуноглобулины, конъюгат остается связанным с соответствующей микролункой, а фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение.

Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигналы, записанные для микролунок отрицательного контроля, вычитают из соответствующих микролунок положительного контроля. Можно количественно оценить реактивность неизвестного образца по шкале от 0 до +++++.

Подробнее