BIO K 369 Multiscreen AbELISA Bovine respiratory / indirect, double wells
Набор ИФА для серодиагностики респираторно-синцитиальной инфекции (BRSV), парагриппа 3 (BPI3), микоплазмоза КРС, Mannheimia haemolytica, аденовируса 3 в сыворотке и плазме крови КРС
Артикул: | BIO K 369 |
Формат теста: | 32 теста |
Разновидность: | Крупный рогатый скот |
Анализируемая матрица: | Сыворотка и плазма крови крупного рогатого скота |
Метод анализа: | Непрямой ИФА, двойные лунки |
Multiscreen AbELISA Bovine respiratory / indirect, double wells | 2 х 16 тестов | BIO K 369/2 |
В тесте используются 96-луночные планшеты для микротитрования, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к трем патогенам (BRSV, BPI3 и аденовирусу). Эти антитела используются для захвата патогенов, а также для их очистки от лизатов клеток, в которых выращивались вирусы. Для Mycoplasma bovis планшет сенсибилизирован рекомбинантным белком Mycoplasma bovis, экспрессируемым E. coli. Ген из Mycoplasma bovis экспрессируется этой рекомбинантной культурой E.coli. Для Mannheimia haemolytica планшет сенсибилизирован очищенным липополисахаридом (LPS). Распределение этих возбудителей на микротитрационном планшете выглядит следующим образом:
Лунки 1 и 7: BRSV
Лунки 2 и 8: BPI3
Лунки 3 и 9: Mycoplasma bovis
Лунки 4 и 10: Mannheimia haemolytica
Лунки 5 и 11: Аденовирус 3
Лунки 6 и 12: отрицательный контроль
Лунки 6 и 12 содержат одно моноклональное антитело. Использование такого контроля значительно снижает количество ложных срабатываний. Исследуемые сыворотки и плазма разбавляются 1:100 в соответствующем буфере и инкубируются на планшете в течение одного часа при 21°С +/- 3°С. Планшет промывают и в лунки добавляют конъюгат, меченое пероксидазой моноклональное антитело против бычьего IgG1. Планшет повторно инкубируют при 21°С +/- 3°С в течение 1 часа. После этой второй инкубации препарат промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в исследуемых сыворотках присутствуют специфические иммуноглобулины, конъюгат остается связанным с соответствующей микролункой, а фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение.
Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигналы, записанные для микролунок отрицательного контроля, вычитают из соответствующих микролунок положительного контроля. Можно количественно оценить реактивность неизвестного образца по шкале от 0 до +++++.