Реагенты и наборы для ПЦР анализа в реальном времени купить в Москве
0

Реагенты для ПЦР анализа

Быстрые и точные результаты анализа биологических жидкостей

Категории
baner1
Расходные материалы для лаборатории от ведущих мировых производителей
shop-neotest.ru
Аналитические стандарты, референсные образцы, реактивы, расходные материалы для хроматографии и микробиологии от ведущих мировых производителей
Подробнее

Товаров нет.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) представляет собой биотехнологический метод, который используется для амплификации (увеличения количества) фрагментов ДНК. ПЦР это искусственная репликация ДНК.

Для проведения ПЦР необходимо наличие в реакционной смеси (РС) ряда основных компонентов.

Праймеры – искусственно синтезированные олигонуклеотиды, имеющие, как правило, размер от 15 до 30 нуклеотидов, идентичные (комплементарные) противоположным концам противоположных цепей искомого участка ДНК-мишени. Служат затравкой для синтеза комплементарной цепи с помощью ДНК-полимеразы и играют ключевую роль в образовании и накоплении продуктов реакции амплификации.

Правильно подобранные праймеры обеспечивают специфичность и чувствительность тест-системы и должны отвечать ряду критериев:

  • быть специфичными. Особое внимание уделяют 3′-концам праймеров, так как именно с них Taq-полимераза начинает достраивать комплементарную цепь ДНК. При недостаточной специфичности праймеров в процессе ПЦР будут образовываться продукты, которые, с одной стороны, могут быть идентифицированы как ложноположительный результат, а с другой стороны, на процессы их накопления будут расходоваться компоненты реакционной смеси, что приведет к значительной потере чувствительности реакции как таковой;
  • не должны образовывать димеры и петли – устойчивые двойные цепи – при отжиге праймеров самих на себя или друг с другом;
  • область отжига праймеров должна находиться вне зон мутаций, делеций или инсерций в пределах видовой или иной специфичности, взятой в качестве критерия при выборе праймеров. При попадании в такую зону не происходит отжига праймеров и, как следствие, возникает ложноотрицательный результат.

Taq-полимераза – термостабильный фермент, который обеспечивает достраивание 3′-конца второй цепи ДНК согласно принципу комплементарности.

Смесь дезоксинуклеотидтрифосфатов (дНТФ) – дезоксиаденозинтрифосфат (дАТФ), дезоксигуанозинтрифосфат (дГТФ), дезоксицитозинтрифосфат (дЦТФ) и дезокситимидинтрифосфат (дТТФ) – строительный материал, используемый Taq полимеразой для синтеза второй цепи ДНК.

Буфер  – смесь катионов и анионов в определенной концентрации, обеспечивающей оптимальные условия для реакции, а также стабильное значение рН.

Анализируемый образец  – подготовленный к внесению в реакционную смесь препарат, который может содержать искомую НК, например ДНК микроорганизмов, служащую мишенью для последующего