Тест-системы для определения содержания Лактоферрина (Lactoferrin)

Свойства лактоферрина

Лактоферрин — гликопротеин, содержащийся в большинстве наружных выделений: молоке, слюне, слезах и др., а также в полиморфноядерных лейкоцитах. Его молекулярная масса составляет 77 кДа, и он содержит 2 сайта связывания одного иона трехвалентного железа (Fe3+). Эта способность фиксировать железо частично объясняет антибактериальную активность лактоферрина. В настоящее время продемонстрированы другие активности этого белка, такие как его влияние на рост клеток, его роль в транспорте железа и его иммуностимулирующее действие.

При воспалительной реакции лактоферрин высвобождается во внеклеточную среду из вторичных гранул нейтрофилов. По концентрации внеклеточного лактоферрина можно определить индекс активации нейтрофилов. Набор Bio-X Bovine Lactoferrin Elisa Kit позволяет определять концентрацию лактоферрина в различных биологических жидкостях (молоке, молозиве, сыворотке крови и т. д.) и в промышленных препаратах (молочные порошки, зубные пасты, искусственная слюна и т. д.). Метод ELISA является быстрым и надежным и особенно подходит для анализа большого количества образцов.

В тесте используются микропланшеты, сенсибилизированные поликлональными антителами, специфичными к бычьему лактоферрину. Возможны перекрестные реакции с лактоферрином других видов (особенно с лактоферрином человека). Предварительно разведенные образцы вносятся одновременно с конъюгатом в микролунки планшета. Конъюгат состоит из очищенного бычьего лактоферрина, химически связанного с пероксидазой. Чтобы получить количественные показания, необходимо построить кривую разбавления известной концентрации бычьего лактоферрина. Этот эталон калибровки поставляется в комплекте. Через час инкубации при 21°C +/- 3°C планшет промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Сравнение сигналов, зарегистрированных для неизвестных образцов, с кривой разбавления калибратора позволяет легко определить концентрацию лактоферрина в исходном образце.

В промышленности лактоферрин используют в качестве консерванта для мяса, кормовой добавки для рыбы, а также в качестве компонента продуктов питания, в том числе, детского. Помимо этого, лактоферрин добавляют в косметические средства и в БАД. В странах Евросоюза приняты максимально допустимые уровни лактоферрина в продуктах питания.

Анализ молока на концентрацию лактоферрина в позволяет определить стадию лактации, а также маститы и другие заболевания вымени. Так, содержание лактоферрина в молоке здоровой коровы составлят от 0,05 до 0,5 г/л. В молоке коров, больных маститами, концентрация этого белка выше: 2 – 7 г/л.