BIO K 028 Multiscreen AbELISA Bovine respiratory
Набор для непрямого ИФА для серодиагностики BoHV-1 (инфекционный ринотрахеит), BVDV (вирусная диарея), BRSV (респираторно-синцитиальная инфекция), BPI3 (парагрипп 3) и Аденовируса 3 в сыворотке и плазме крови крупного рогатого скота
Артикул: | BIO K 028 |
Формат теста: | 32 теста |
Разновидность: | Крупный рогатый скот |
Матрица: | Сыворотка и плазма крови |
Метод анализа: | Непрямой ИФА, двойные лунки |
Multiscreen AbELISA Bovine respiratory / indirect, double wells | BIO K 028/2 | 2 х 16 тестов |
BIO K 028/5 | снят с производства |
В тесте используются 96-луночные планшеты для микротитрования, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к пяти перечисленным выше патогенам. Эти антитела используются для захвата патогенов, а также для их очистки от лизатов клеток, в которых выращивались вирусы. Распределение этих возбудителей на микротитрационном планшете выглядит следующим образом:
Лунки 1 и 7: BoHV-1
Лунки 2 и 8: BVDV
Лунки 3 и 9: BRSV
Лунки 4 и 10: BPI3
Лунки 5 и 11: Аденовирус 3
Лунки 6 и 12: антигены отрицательного контроля для вируса
Лунки 6 и 12 содержат лизат клеточной линии бычьей почки, который использовали в качестве субстрата для размножения вирусов. Таким образом, у нас есть подлинный отрицательный контроль для дифференциации вирусспецифических антител от антител, направленных против антигенных детерминант клеток почек, используемых для их репликации. Использование такого контроля значительно снижает количество ложных срабатываний. Исследуемые сыворотки и плазма разбавляются 1:100 в соответствующем буфере и инкубируются на планшете в течение одного часа при 21°С +/- 3°С. Планшет промывают и в лунки добавляют конъюгат, меченое пероксидазой моноклональное антитело против бычьего IgG1. Планшет повторно инкубируют при 21°С +/- 3°С в течение 1 часа. После этой второй инкубации препарат промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в исследуемых сыворотках присутствуют специфические иммуноглобулины, конъюгат остается связанным с соответствующей микролункой, а фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигналы, записанные для микролунок отрицательного контроля, вычитают из соответствующих микролунок положительного контроля. Можно количественно оценить реактивность неизвестного образца по шкале от 0 до +++++.