BIO K 004 Monoscreen AbELISA BVDV (NS3) / indirect, double wells
Набор для непрямого ИФА для серодиагностики вирусной диареи в сыворотке и плазме крови, молоке крупного рогатого скота (BVDV)
Артикул: | BIO K 004 |
Формат теста: | 240 тестов |
Разновидность: | Крупный рогатый скот |
Матрица | Сыворотка крови, плазма, молоко |
Метод анализа: | Непрямой ИФА, двойные лунки |
Multiscreen AbELISA Bovine respiratory / indirect, double wells | BIO K 004/2 | снят с производства |
BIO K 004/5 | 5 х 48 тестов |
В тесте используются 96-луночные микротитровальные планшеты, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к одной из антигенных детерминант вируса BVDV. Это антитело используется для захвата вируса, а также для его очистки от лизата клеток, в которых рос вирус. Нечетные столбцы планшета (1, 3, 5, 7, 9 и 11) содержат вирус, тогда как четные столбцы (2, 4, 6, 8, 10 и 12) содержат лизат клеточной линии бычьей почки, который использовали в качестве субстрат для размножения вируса. Таким образом, у нас есть подлинный отрицательный контроль для дифференциации специфического противовирусного антитела от антител, направленных против антигенных детерминант клеток бычьей почки, используемых для его репликации. Использование такого контроля значительно снижает количество ложных срабатываний.
Исследуемые сыворотки крови, плазмы или молока разводят в буфере для разведения. Образцы добавляют в планшет, который затем инкубируют и промывают. В лунки добавляют конъюгат, меченое пероксидазой моноклональное антитело против бычьего IgG1. Затем планшет инкубируют второй раз при 21°С +/- 3°С, снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в исследуемой сыворотке, плазме или молоке присутствуют специфические анти-BVDV иммуноглобулины, конъюгат остается связанным с микролункой, содержащей вирусный антиген, и фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигнал, считанный с микролунки отрицательного контроля, вычитается из сигнала положительной микролунки, сенсибилизированной вирусным антигеном. Можно количественно оценить реактивность неизвестного образца по шкале от 0 до +++++.