BIO K 270 Multiscreen AgELISA Enterotoxemia/sandwich, double wells (V2.0)
Тест-система Мультискрин для антигенной диагностики Clostridium perfringens и альфа-, бета-, эпсилон-токсинов в супернатантных культурах и биологических жидкостях сэндвич ИФА методом
Артикул: | BIO K 270 |
Формат теста: | 24 теста |
Разновидность: | Все виды |
Матрица: | Культуральные супернатанты и биологические жидкости |
Метод анализа: | Сэндвич ИФА, двойные лунки |
Multiscreen AgELISA Enterotoxemia / sandwich, double wells | 24 теста | BIO K 270/2 |
Специфические моноклональные и поликлональные антитела, продуцируемые против альфа-, бета- и эпсилон-токсинов Clostridium perfringens, и моноклональные антитела, специфичные к структурному белку этой бактерии, были иммобилизованы на чередующихся рядах 8х12-луночных микротитрационных планшетов. Эти антитела позволяют специфически захватывать соответствующие токсины или бактерии, которые могут присутствовать в образцах (кишечная жидкость, культуральные супернатанты, биологические жидкости и т. д.). Ряды A, C, E, G были сенсибилизированы этими антителами, а ряды B, D, F и H покрыты неспецифическими антителами в качестве контроля.
Все образцы, кроме культуральных супернатантов, разбавляют буфером для разведения и инкубируют на микропланшете в течение 1 часа при 21°С +/- 3°С.
После этой первой стадии инкубации планшет промывают, затем в лунки добавляют конъюгаты – меченные пероксидазой моноклональные или поликлональные антитела против патогенов. Затем планшет повторно инкубируют в течение 1 часа при 21°C +/- 3°C. После этой второй стадии инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин ТМБ). Этот хромоген имеет то преимущество, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным.
Если в тестируемых образцах присутствуют специфические токсины, конъюгаты остаются связанными с соответствующими микролунками, а фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру конкретного патогена в образце. Ферментативную реакцию можно остановить подкислением, а результирующую оптическую плотность при 450 нм можно считать с помощью фотометра. Сигналы, считанные для микролунок отрицательного контроля, вычитаются из соответствующих микролунок положительного контроля.
Контрольный антиген поставляется с набором для подтверждения результатов теста.
Тип токсина | Альфа | Тета | Бета | Эпсилон | Йота |
A | ++ | ++ | – | – | – |
B | + | ++ | ++ | + | – |
C | + | ++ | ++ | – | – |
D | + | ++ | – | ++ | – |
E | + | ++ | – | – | ++ |