BIO K 273 Monoscreen AgELISA Инфекционный гематопоэтический некроз рыб
BIO K 273 Monoscreen AgELISA IHNV / sandwich, double wells
Набор для ИФА сэндвич-типа для антигенной диагностики вируса инфекционного гемопоэтического некроза рыб
Артикул:
BIO K 273
Производитель:
BIO-X
Характеристики:
| Артикул: | BIO K 273 |
| Формат теста: | 96 тестов |
| Разновидность: | Рыба |
| Метод анализа: | Сэндвич ИФА, двойные лунки |
Дополнительная информация:
Информация для заказа
| Monoscreen AgELISA IHNV / sandwich, double wells | 2 х 48 тестов | BIO K 273/2 |
Принцип работы теста
Золотым стандартом выявления ВЗГН является выделение вируса в культуре клеток с последующей его иммунологической или молекулярной идентификацией. Инфицированные образцы полностью гомогенизируют (либо с помощью мешалки, блендера, либо с помощью ступки и пестика со стерильным песком), а затем суспендируют в культуральной среде с добавлением антибиотиков. Препарат центрифугируют и 24-луночный планшет для культивирования клеток инокулируют серийными разведениями супернатанта. Через 1 час инкубации при оптимальной температуре в каждую лунку добавляют питательную среду и планшет инкубируют до появления цитопатогенного эффекта. В этот момент пластина застывает. Он готов к тестированию методом ИФА. В тесте используются 96-луночные планшеты для микротитрования, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к вирусу ИГН. Ряды A, C, E, G были сенсибилизированы этим антителом, а ряды B, D, F, H содержат
неспецифические антитела. Эти контрольные ряды позволяют различать специфические иммунологические реакции и неспецифическое связывание, чтобы исключить ложноположительные результаты.
Супернатанты инкубируют на микропланшете в течение 1 часа при 21°С +/- 3°С.
После этой первой стадии инкубации планшет промывают и инкубируют в течение 1 часа с конъюгатом, меченым пероксидазой моноклональным антителом против IHNV. После этой второй инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Этот хромоген имеет то преимущество, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если IHNV присутствует в супернатанте клеточной культуры, конъюгат остается связанным с соответствующими микролунками, а фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего окрашивания пропорциональна титру IHNV в супернатанте. Ферментативную реакцию можно остановить подкислением и полученную оптическую плотность при 450 нм записывают с помощью фотометра. Сигналы, зарегистрированные для микролунок отрицательного контроля, вычитаются из соответствующих положительных контрольных лунок.
микролунки. Положительный контроль предоставляется вместе с набором для подтверждения результатов теста. Этот набор не дает перекрестной реакции с VHSV.
Похожие товары:
