BIO K 264 Multiscreen VHSV и IHNV AgELISA
BIO K 264 Multiscreen AgELISA VHSV-IHNV / sandwich, double wells
Набор для ИФА сэндвич-типа для антигенной диагностики вирусной геморрагической септицемии и вирус инфекционного гемопоэтического некроза у рыб
Артикул:
BIO K 264
Производитель:
BIO-X
Характеристики:
| Артикул: | BIO K 264 |
| Формат теста: | 48 тестов |
| Разновидность: | Рыба |
| Метод анализа: | Сэндвич ИФА, двойные лунки |
Дополнительная информация:
Информация для заказа
| Multiscreen AgELISA VHSV-IHNV / sandwich, double wells | 2 х 24 теста | BIO K 264/2 |
Принцип работы теста
Золотым стандартом для выявления IHNV и VHSV является выделение вируса в культуре клеток с последующей его иммунологической или молекулярной идентификацией. Инфицированные образцы полностью гомогенизируют (либо с помощью мешалки, блендера, либо с помощью ступки и пестика со стерильным песком), а затем суспендируют в культуральной среде с добавлением антибиотиков. Препарат центрифугируют и 24-луночный планшет для культивирования клеток инокулируют серийными разведениями супернатанта. Через 1 час инкубации при оптимальной температуре в каждую лунку добавляют питательную среду и планшет инкубируют до появления цитопатогенного эффекта. В этот момент пластина застывает. Он готов к тестированию методом ИФА. В тесте используются 96-луночные микротитровальные планшеты, сенсибилизированные специфическими антителами к вирусам VHS и IHN. Ряды A и E были сенсибилизированы анти-VHSV, ряды C и G – анти-IHNV, а ряды B, D, F, H содержат неспецифические антитела. Эти контрольные ряды позволяют различать специфические иммунологические реакции и неспецифическое связывание, чтобы исключить ложноположительные результаты.
Супернатанты инкубируют на микропланшете в течение 1 часа при 21°С +/- 3°С.
После этой первой стадии инкубации планшет промывают и инкубируют в течение 1 часа с конъюгатами, мечеными пероксидазой специфическими моноклональными антителами против VHSV и против IHNV. После этой второй инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Этот хромоген имеет то преимущество, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если VHSV или IHNV присутствуют в супернатанте клеточной культуры, конъюгаты остаются связанными с соответствующими микролунками, и фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру VHSV или IHNV в супернатанте. Ферментативную реакцию можно остановить подкислением и полученную оптическую плотность при 450 нм записывают с помощью фотометра. Сигналы, записанные для микролунок отрицательного контроля, вычитают из соответствующих микролунок положительного контроля. Контрольный антиген предоставляется вместе с набором для подтверждения результатов теста.
Похожие товары:
