Купить BIO K 264/2 Multiscreen VHSV и IHNV AgELISA - Neo-test
0

BIO K 264/2 Multiscreen VHSV и IHNV AgELISA

BIO K 028/2 Multiscreen AbELISA Респираторно-синцитиальная инфекция, фото

BIO K 264/2 Multiscreen AgELISA VHSV-IHNV / sandwich, double wells

Набор для ИФА сэндвич-типа для антигенной диагностики вирусной геморрагической септицемии и вирус инфекционного гемопоэтического некроза у рыб

Артикул:
BIO K 264/2
Производитель:
BIO-X
Характеристики:
Артикул: BIO K 264/2
Формат теста: 2 х 96 луночных планшета по 24 теста в каждом
Дополнительная информация:

Золотым стандартом для выявления IHNV и VHSV является выделение вируса в культуре клеток с последующей его иммунологической или молекулярной идентификацией. Инфицированные образцы полностью гомогенизируют (либо с помощью мешалки, блендера, либо с помощью ступки и пестика со стерильным песком), а затем суспендируют в культуральной среде с добавлением антибиотиков. Препарат центрифугируют и 24-луночный планшет для культивирования клеток инокулируют серийными разведениями супернатанта. Через 1 час инкубации при оптимальной температуре в каждую лунку добавляют питательную среду и планшет инкубируют до появления цитопатогенного эффекта. В этот момент пластина застывает. Он готов к тестированию методом ИФА. В тесте используются 96-луночные микротитровальные планшеты, сенсибилизированные специфическими антителами к вирусам VHS и IHN. Ряды A и E были сенсибилизированы анти-VHSV, ряды C и G – анти-IHNV, а ряды B, D, F, H содержат неспецифические антитела. Эти контрольные ряды позволяют различать специфические иммунологические реакции и неспецифическое связывание, чтобы исключить ложноположительные результаты.

Супернатанты инкубируют на микропланшете в течение 1 часа при 21°С +/- 3°С.
После этой первой стадии инкубации планшет промывают и инкубируют в течение 1 часа с конъюгатами, мечеными пероксидазой специфическими моноклональными антителами против VHSV и против IHNV. После этой второй инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Этот хромоген имеет то преимущество, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если VHSV или IHNV присутствуют в супернатанте клеточной культуры, конъюгаты остаются связанными с соответствующими микролунками, и фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру VHSV или IHNV в супернатанте. Ферментативную реакцию можно остановить подкислением и полученную оптическую плотность при 450 нм записывают с помощью фотометра. Сигналы, записанные для микролунок отрицательного контроля, вычитают из соответствующих микролунок положительного контроля. Контрольный антиген предоставляется вместе с набором для подтверждения результатов теста.

Похожие товары: