BIO K 063 Monoscreen AbELISA Bovine adenovirus 3 /indirect, double wells
Набор для непрямого ИФА для серодиагностики аденовируса 3 в сыворотке крови, плазме, молоке крупного рогатого скота
Артикул: | BIO K 063 |
Формат теста: | 96 тестов |
Разновидность: | Крупный рогатый скот |
Матрица: | Сыворотка и плазма крови, молоко |
Метод анализа: | Непрямой ИФА, двойные лунки |
Monoscreen AbELISA Bovine rotavirus / Competition | 2 х 48 тестов | BIO K 063/2 |
В тесте используются 96-луночные планшеты для микротитрования, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к одной из антигенных детерминант аденовируса 3. Это антитело используется для захвата вируса, а также для его очистки от лизата клеток, в которых вирус выращивался. Нечетные лунки планшета (1, 3, 5, 7, 9 и 11) содержат вирус, тогда как четные лунки (2, 4, 6, 8, 10 и 12) содержат лизат клеточной линии бычьей почки, которая использовалась как субстрат для размножения вируса. Таким образом, у нас есть подлинный отрицательный контроль для дифференциации специфического противовирусного антитела от антител, направленных против антигенных детерминант клеток бычьей почки, используемых для его репликации. Использование такого контроля значительно снижает количество ложных срабатываний.
Исследуемые сыворотки крови, плазмы или молока разводят в буфере для разбавления. Планшет инкубируют и промывают, затем в лунки добавляют конъюгат, меченое пероксидазой моноклональное антитело против бычьего IgG1. Затем планшет инкубируют второй раз при 21°С +/- 3°С, снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Этот хромоген имеет то преимущество, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в образце присутствуют специфические иммуноглобулины аденовируса 3, конъюгат остается связанным с микролункой, содержащей вирусный антиген, и фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигнал, считанный с микролунки отрицательного контроля, вычитается из сигнала положительной микролунки, сенсибилизированной вирусным антигеном. Можно количественно определить реактивность неизвестной сыворотки по шкале от 0 до +++++.